當一個臨床醫師告訴你,他的臨床診斷與檢驗結果不符時你怎麼辦?是檢驗結果錯誤? 臨床判斷不對 ? 或是因為有〝可〞或〝不可〞避免的特殊因素需要考慮 ?
這個問題很複雜且需花很多功夫去探討。要解決這問題需要具備個別疾病之生理病理知識,並了解檢驗技術中影響一般及特定項目之因素。一般的實驗室人員僅能有良好的品管並排除干擾因素,把檢驗做得完美無缺。醫檢師還需要有深入的基礎與臨床醫學知識,幫助臨床醫師解決問題。
當遇到測定結果與臨床判斷不符時需往三個方向探索:
1、檢体取得的適當性
2、檢測原理、步驟與干擾因素
3、疾病的特性、變異性、及與測定方法的關係。
分別敘述如下: |
1、檢体取得的適當性: |
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1.採血前病人之準備: |
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(a) |
禁食與否? 如:AC、Cholesterol、Triglyceride、Gastrin、Insulin、C-peptide、
GH、PTH 、Calcitonin、IGF1 等檢查需禁食 |
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(b) |
姿勢 ? 如Aldosterone、Renin等 |
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(c) |
停藥 ? 服藥中 ? 如測定Aldosterone 、Cortisol等 |
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(d) |
是否已解除壓力 ? 如DHEA-S等 |
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2.Stress、Activity、and Posture: |
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如Cortisol/ACTH、Renin/Angiotensin/Aldosterone、
Androstenedione 、Catecholamines 、Prolactin、GH等需考慮。 |
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3.採血時間: |
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如Cortisol/ACTH、Gonadral hormones、HGH、Prolactin、 Renin/Angiotensin/Aldosterone
等需注意時間。很多內分泌激素有晝夜分泌規律。 |
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4.懷孕: |
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如Thyroid hormones、Cortisol、Aldosterone、CA-125、HCG等 |
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5.檢体: |
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(a) |
需使用plasma:ACTH、Renin activity、PTH、ADH等 |
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(b) |
Plasma should be collected on ice water, deliver immediately, cold spin then freeze at -20℃after separation. |
2、測定原理與干擾因素 |
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1、敏感度與特異性:以商用kit操作時可由說明書取得,需注意 : |
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(a) |
Standard curve之working range(有用的測定範圍值):標準線的兩端即極低與極高值是較不
準確的。Compititive binding assay之working range窄,大於特定值無法區分。Hook effect而致降低預期值,或將陽性值誤判為陰性、如AFP、HCG等。此時需將檢体稀釋後再操作。 |
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(b) |
服用藥物時需知道為何藥,是否會有交叉反應而被測定系統測到,使結果值偏高。 |
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2、精確性(precision)與正常值: |
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(a) |
探討測定系統之intraassay與interassay之correlation variation (C.V.值) |
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(b) |
每個實驗室必需建立自己的正常值範圍,為臨床判讀的參考。 |
3、血清(漿)內干擾物質的影響: |
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1、非激素因素: |
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抗凝劑、膽紅素(bilirubin)、高血脂、溶血、蛋白及免疫球蛋白等。 |
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2、激素因素: |
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(a) |
激素異構物( heterogeneity of hormone) 例如Intact PTH、
C-terminal PTH、與N-terminal PTH。 |
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(b) |
生物活性不同但因構造相似而有交叉反應,例如TSH、LH、FSH、HCG。 |
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評估是否受到干擾物的影響可做檢体稀釋試驗(或謂平行parallelism試驗 )。 |
4、疾病的生理病理與檢驗方法的關係: |
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需了解檢驗方法並具備基礎及臨床醫學知識。以下利用血清甲狀腺功能檢查來說明:
有一些正常人或非甲狀腺疾病的病人,他們的甲狀腺功能實質上是正常,但檢驗結果卻有變化,而有些甲狀腺高或低能症病人,驗出結果卻與一般此類病人有異,而影響正確診斷。臨床上常發生於: |
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1、 |
甲狀腺功能正常但有全身性疾病時,稱Nonthyroidal illness(NTI)、Sick euthyroid syndrome、Low T3 syndrome。 |
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2、 |
藥物影響。 |
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3、 |
家族不良白蛋白高四碘甲狀腺素血症,Familial dysalbuminemic hyperthyroidism、Familial euthyroid T4 excess。 |
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4、 |
血液內有甲狀腺激素自体抗体,Autoantibodies against thyroid hormones。 |
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5、 |
先天性甲狀腺結合球蛋白過多或缺乏,congenital TBG excess or deficiency。
目前診斷甲狀腺疾病的第一線血清功能檢查以FT4及高敏感度TSH為主。測定血清中FT4理論上是最能反應甲狀腺功能的檢查,如果能直接測定是最理想的檢驗方法,近二十年來有非常多的文獻報告,欲利用它來鑑別診斷NTI病人,在測定技術上也一直力求改進,但至目前尚無法有效突破,原因有三:(1) FT4在血清內的量非常低,需要非常敏感的方法。(2) 測定過程裡需避免影響到T4與FT4之平衡。(3)一些病人血清裡,尤其NTI病人,含有抑制物質及干擾物質,會使測量失效(invalid)。
目前FT4有下列測定方法: |
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(1) 直接法: |
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操作時先將游離與結合型T4利用物理方法分開,如equilibrium dialysis或ultrafiltration,
再用RIA測定。此法測定出的結果可謂〝標準參考值〞。因技術困難費時又昂貴,目前臨床實驗室較少使用。 |
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(2) 間接法:分以下三種 |
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(A)Index method : |
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常用free T4 index(FTI). FTI = T4 x T3 uptake |
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(B)Two-step immunoassay: |
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利用結合在固相物上的抗体將FT4吸住瘁取,再利用RIA測定。 |
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(C)Analog immunoassay: |
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利用T4 analog當標記物,理論上這些標記物會與抗体結合,不會與血清裡的結合蛋白(binding protein)結合,應用於正常人,高能症,低能症,及血清中TBG濃度稍有變化的懷孕病人或口服黃体激素的病人是最佳選擇方法。因操作簡單省時又方便,是目前最常用的方法。但是實際上許多研究發現T4 analog會與prealbumin及albumin結合,因此測定結果的正確性有爭議,臨床應用仍有些問題,尤其對幾種異常生理或病理的人,包括NTI,診斷易見弱點。 |
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•NTI病人血清RIA測定結果可能有兩種形式: (↓降低 、↑升高 、→正常) |
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T 3 T4 FT4 rT3 FTI TSH |
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↓ → →↑ ↑ → →↑ |
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↓ ↓ →↓ ↑ → ↓ ↓→ |
•藥物影響的因素有: |
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1. |
Caused by alterations in binding protein:estrogen、Opiates、Androgen。 |
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2. |
Caused by competition for binding protein:salicylate、heparin、fenclofenac、phenylbutazone。 |
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3. |
Caused by enzyme induction - enhancing the activity of iodothyronine metabolizing enzymes:rifampicin
、phenobarbital。 |
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4. |
Caused by inhibition of the conversion of T4 to T3:propranolol、glucocorticoid、contrast media、amiodarone。 |
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5. |
Caused by inhibition of thyroid function:iodide。 |
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6. |
Caused by alteration in the TSH secretory mechanism:metoclopramide、dopamine、 D-thyroxine。 |
•家族不良白蛋白高四碘甲狀腺素血症:(以放射免疫方法為例) |
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(A) |
會導致錯誤判斷的檢驗方法及結果 |
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(1) T4 (2) FTI (3) T4-TBG ratio (4)利用analog方法測得的FT4值。 |
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(B) |
有效判斷的檢驗方法及結果 |
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(1) T3 (2) FT3 (3) TRH test (4)利用equilibrium dialysis或two-step法測得的FT4。 |
•血液內有甲狀腺激素自体抗体 |
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(A) |
RIA使用liquid phase單抗体法時,測得T4 (或T3)值降低。 |
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(B) |
RIA使用liquid phase雙抗体法或solid phase法時,測得T4(或T3)值增高。 |
•先天性甲狀腺結合蛋白過多或缺乏 |
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利用equilibrium dialysis method測得FT4正常,analog method FT4不正常。 |